百级层流手术室的设计与建设标准主要遵循《医院洁净手术部建筑技术规范》GB50333-2013，其设计标准包括净化级别、规模设定、空调系统要求以及技术指标参数；它的建设标准则涉及空间布局与流程设计、结构材料选择、施工工艺和质量控制等多个方面。
标准的具体内容如下：
净化级别：环境空气中大于等于0.5μm的微粒数大于350粒/立方米（0.35粒/L）到小于等于3500粒/立方米（3.5粒/L），大于等于5μm的微粒数为0的空气洁净程度，相当于原100级。
规模设定：设计医务人员负荷人数12人〜14人。
空调系统要求：每间百级手术室应采用独立的新风空调净化系统。
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技术指标参数：包括室内压力（正压）、最小换气次数、工作区平均风速（0.20~0.25 m/s）、温度（21~25摄氏度）、相对湿度（30~60%）、最小新风量（15~20m³/小时•m²）、噪音（小于或等于51分贝）、最低照度（大于或等于350勒克斯）、最少术间自净时间（10分钟）。
空间布局与流程设计：确保手术室内部流程合理，减少交叉感染风险，要考虑到医护人员的操作便利性和患者的舒适度。
结构材料选择：选择耐腐蚀、易清洁、不易积尘的材料，如彩钢板、不锈钢等，要考虑材料的隔音性能，以减少噪音对手术的影响。
施工工艺：严格按照规范进行施工，确保手术室的密闭性和气密性，在施工过程中，要注意防止污染，确保施工现场的清洁和卫生。
质量控制：在建设过程中，要进行严格的质量控制，确保各项指标达到设计要求，要对施工人员进行专业培训，提高他们的技术水平和质量意识。
